【如何配置TTC溶液】在实验室中,TTC(2,3,5-三苯基四氮唑氯化物)常用于检测细胞活性或酶活性,特别是在脱氢酶活性测定中。TTC溶液的正确配置对于实验结果的准确性至关重要。以下是对TTC溶液配置方法的总结与操作步骤。
一、TTC溶液配置方法总结
步骤 | 操作内容 | 注意事项 |
1 | 准备所需试剂 | 需要TTC粉末、蒸馏水或缓冲液(如PBS)、天平、烧杯、磁力搅拌器等 |
2 | 计算所需浓度 | 常用浓度为0.5%~1%,根据实验需求调整 |
3 | 称取适量TTC | 使用分析天平准确称量,避免误差 |
4 | 溶解TTC | 将TTC加入适量蒸馏水中,加热并搅拌至完全溶解 |
5 | 过滤与分装 | 使用0.22 μm滤膜过滤,分装后避光保存 |
6 | 标识与储存 | 写明配制日期、浓度及储存条件,通常冷藏保存 |
二、详细操作流程
1. 准备材料:确保所有实验器具清洁无污染,使用高纯度蒸馏水或PBS作为溶剂。
2. 计算用量:例如,若需配置100 mL 0.5% TTC溶液,则需要0.5 g TTC粉末。
3. 称量TTC:使用电子天平精确称量所需质量,避免直接接触皮肤。
4. 溶解TTC:将TTC加入烧杯中,加入约80 mL蒸馏水,加热至60℃左右,同时使用磁力搅拌器加速溶解。
5. 定容与过滤:冷却至室温后,补足至100 mL,使用无菌滤膜过滤以去除杂质。
6. 分装与保存:将溶液分装至干净的棕色玻璃瓶中,避光低温保存(通常为4℃),避免反复冻融。
三、注意事项
- TTC溶液应现配现用,避免长时间存放导致降解。
- 操作过程中佩戴手套和护目镜,防止接触皮肤或眼睛。
- 避免高温或强光照射,以免影响溶液稳定性。
- 实验结束后,按实验室规定处理废液。
通过以上步骤,可以有效配置出稳定且符合实验要求的TTC溶液,为后续的细胞活性检测提供可靠的基础。